University of Twente Student Theses

Login

Implementing a green fluorescent protein tag coupled to Zonula Occludens-1 in brain endothelial cells

Bosch, S.W.T. (2022) Implementing a green fluorescent protein tag coupled to Zonula Occludens-1 in brain endothelial cells.

[img] PDF
65MB
Abstract:De bloed-brein barrière (BBB) speelt een cruciale rol bij de bescherming van het brein tegen ziekteverwekkers. Echter kunnen door deze rol de medicijnen het brein ook niet bereiken. Dit komt door de tight-junctions tussen de endotheelcellen van de BBB. In dit onderzoek worden hCMEC/D3 endotheelcellen getransfecteerd met een plasmide, die een GFP-tag bevat en deze bindt aan het ZO-1 eiwit van de tight-junctions. Er is gevonden dat deze cellen getransfecteerd kunnen worden met Lipofectamine 3000 en Lipofectamine LTX in Heparine-vrij medium. Andere transfectie reagentia zoals DharmaFECT, ViaFECT en Lipofectamine 2000 werkten niet op de hCMEC/D3 cellen. Ook werkte Opti-MEM en EGM-2 niet als geschikt medium voor alle transfectie reagentia. Vervolgens is er een kill curve gedaan met G418 selectief antibioticum en dit gaf geschikte concentraties G418 selectieve antibioticum. Deze concentraties zijn vervolgens toegepast op het genereren van een stabiele cellijn. Wanneer dit gelukt is, kunnen de endotheelcellen van de BBB live gemonitord worden en kan het mechanisme van het openbreken van de BBB beter onderzocht worden.
Item Type:Essay (Bachelor)
Faculty:TNW: Science and Technology
Subject:42 biology
Programme:Biomedical Technology BSc (56226)
Link to this item:https://purl.utwente.nl/essays/95074
Export this item as:BibTeX
EndNote
HTML Citation
Reference Manager

 

Repository Staff Only: item control page